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人干擾素誘導(dǎo)蛋白44Elisa試劑盒說明書
人干擾素誘導(dǎo)蛋白44(IFI44)Elisa試劑盒。本說明書將為您提供詳細(xì)的使用指南，以確保您能夠準(zhǔn)確、有效地進(jìn)行實驗操作。請您在使用前仔細(xì)閱讀，并按照步驟進(jìn)行操作。
一、產(chǎn)品概述 本試劑盒采用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人干擾素誘導(dǎo)蛋白44(IFI44)的水平。通過純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，與待測樣品中的人干擾素誘導(dǎo)蛋白44結(jié)合，再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后，加入底物TMB顯色，以測定樣品中IFI44的含量。
二、實驗準(zhǔn)備
1. 請確保實驗環(huán)境清潔，避免污染。
2. 將試劑盒及所需試劑置于室溫下平衡30分鐘。
3. 準(zhǔn)備實驗所需的加樣器、移液管、試管等器材，并確保其清潔干燥。
三、操作步驟
1. 加樣：按照實驗設(shè)計，分別設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上準(zhǔn)確加樣50μl標(biāo)準(zhǔn)品，待測樣品孔中先加入40μl樣品稀釋液，再加入10μl待測樣品(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣時請注意，樣品應(yīng)加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
2. 溫育：用封板膜封板后，將酶標(biāo)板置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘。
3. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍，備用。
4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干。每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
6. 再次溫育：同步驟2。
7. 再次洗滌：同步驟4。
8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，置37℃避光顯色15分鐘。
9. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
10. 測定：在加終止液后15分鐘以內(nèi)，使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定各孔的光密度(OD值)。
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