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熒光定量PCR 96孔板封膜操作指南
一、封膜前準備
材料選擇?
使用原廠認證的96孔板(如Roche白色矮管或Bio-Rad QPCR管)?
選擇光學透明封板膜(透光率≥90%)或鋁箔熱封膜(需匹配儀器檢測模式)?
環境控制?
操作環境溫度建議20-30℃,避免低溫導致膜材變硬?
戴無粉手套操作,防止指紋污染光學檢測面?
二、封膜操作步驟
襯紙剝離?
單端標簽膜:先錨固一端,逐步撕除襯紙消除卷曲?
雙端標簽膜:平滑剝離中心襯紙,避免接觸粘合面?
壓膜規范?
使用壓膜板或光滑卡片,水平/垂直各刮壓2次?
重點處理四角區域,確保無氣泡殘留?
三、質量驗證
完整性檢查?:密封后確認無褶皺,孔周應有均勻粘貼痕跡?
壓力測試?:37℃孵育2小時后液體蒸發量應<5μL/孔?
四、自動化封膜(可選)
使用PCR-Sealer封板機時,需根據膜材設置熱封溫度(通常120-150℃)和時間(1-3秒)?
全自動封膜機可適配卷膜格式,適合高通量實驗?
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
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