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以下是?人補體因子H(CFH)ELISA試劑盒?的實驗使用說明書核心內(nèi)容：
BS-0638人補體因子H(CFH)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用?雙抗體夾心法?：
微孔板預(yù)包被抗人CFH抗體捕獲樣本中的CFH
加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成復(fù)合物
TMB顯色(藍(lán)色→黃色)，450nm測OD值，濃度與吸光度正相關(guān)
二、試劑盒組成
組分 規(guī)格(96T/48T) 保存條件
預(yù)包被微孔板 1×96孔/1×48孔 2-8℃
CFH標(biāo)準(zhǔn)品(凍干) 0.5mL×6管(0-40ng/mL) -20℃
HRP標(biāo)記抗體 6mL/3mL 2-8℃
TMB底物 9mL/6mL 避光4℃
20×洗滌緩沖液 25mL/15mL(需1:20稀釋) 室溫
三、樣本處理
血清/血漿?：3000×g離心10-20分鐘，避免溶血或脂血
組織勻漿?：生理鹽水研磨后離心取上清
保存要求?：-20℃分裝，避免反復(fù)凍融(≤3次)
四、操作步驟
平衡試劑?：所有組分室溫平衡20分鐘
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶?：加0.5mL稀釋液溶解凍干標(biāo)準(zhǔn)品
加樣溫育?：
依次加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μL→檢測抗體50μL
37℃孵育60分鐘
洗滌?：手工洗板5次(每孔加滿洗滌液靜置1分鐘)
顯色?：加入TMB 100μL，避光反應(yīng)15分鐘
終止?：加終止液50μL，10分鐘內(nèi)測OD450nm
五、注意事項
靈敏度?：1.88-8.54ng/mL(不同品牌差異)
精密度?：板內(nèi)CV<10%，板間CV<15%
干擾因素?：避免細(xì)菌污染、反復(fù)凍融或劇烈震蕩樣本
失效判斷?：陰性對照OD值≥0.12需棄用
六、結(jié)果計算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，樣本濃度需乘以稀釋倍數(shù)。建議使用生工生物或艾美捷科技等供應(yīng)商提供的專業(yè)分析軟件。
注：不同品牌試劑盒參數(shù)可能存在差異，請以實際隨貨說明書為準(zhǔn)。
注：以上資料僅供參考，具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。
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