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雞沙門氏菌抗體(Salmonella-Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-4399雞沙門氏菌抗體(Salmonella-Ab)ELISA試劑盒96T/48T
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用間接法ELISA技術(shù)，通過預(yù)包被沙門氏菌抗原捕獲樣本中的特異性抗體，再結(jié)合酶標(biāo)二抗顯色，顯色強(qiáng)度與抗體濃度呈正相關(guān)。
二、試劑組成
預(yù)包被微孔板：沙門氏菌抗原包被的12×8孔可拆板條。
標(biāo)準(zhǔn)品：6瓶(0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb)，需現(xiàn)配現(xiàn)用。
酶結(jié)合物：抗雞IgG-HRP標(biāo)記物。
顯色液A/B：TMB底物系統(tǒng)，避光保存。
終止液：2M溶液，具腐蝕性。
三、操作步驟
樣本處理
血清/血漿：4℃靜置后1000×g離心10分鐘，避免溶血。
組織勻漿：按1:9加入PBS勻漿，5000×g離心取上清。
加樣與溫育
每孔加50μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本(稀釋度5倍)及100μL酶結(jié)合物。
37℃避光溫育60分鐘，封板膜密封。
洗滌與顯色
洗滌液(20×稀釋)洗滌5次，拍干。
每孔加顯色液A/B各50μL，37℃顯色15分鐘。
終止與檢測
加50μL終止液后15分鐘內(nèi)測定450nm吸光度。
四、注意事項(xiàng)
安全防護(hù)：避免接觸終止液和底物B，操作時(shí)戴手套。
試劑保存：2~8℃冷藏，標(biāo)準(zhǔn)品勿反復(fù)凍融。
質(zhì)量控制：每樣本設(shè)復(fù)孔，OD值波動(dòng)范圍≤15%。
五、結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度對數(shù)與OD值擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣本濃度通過曲線方程計(jì)算。
注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具體產(chǎn)品資料請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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